科学启蒙循环中移植细胞外泌体是监测移植细

又到了每季度一次的前沿介绍和科研启蒙环节~

由于没能约到稿！

所以这次还是心血管病方面的

循环中移植细胞外泌体是监测移植细胞状态、探索机制的非侵入性方法

BYLANCIL

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本文发表于SciTranslMed(IF=16)

(这篇文章很精妙，只可惜不是我写的)

研究要解决的问题

干细胞研究领域由于不能以可重复的、时间敏感的和条件特异性的方式对靶器官内的移植细胞进行非侵入性监测而受到阻碍。即难以知道注射的细胞去了哪里，剩了多少，特别是，功能如何？

干细胞分泌体的组成部分，包括外泌体，通过供者年龄相关的途径促进心肌恢复。研究表明心脏祖细胞（CPC）或心球细胞来源细胞（CDC）的部分疗效可能归功于它们的外泌体。移植的干细胞/祖细胞将释放外周血信号，作者假设，对受体血浆中移植细胞衍生的外泌体进行量化和表征将能够可靠、非侵入性地监测移植细胞的活动。那么究竟是否可行呢？

研究过程与结果

序

内容

结果

结论

1

细胞获取：取心脏手术时因严重动脉粥样硬化行冠状动脉旁路移植术的成人患者（平均年龄68岁）的右心耳（RAA）心肌活检标本。使用作者先前修改的方法（包括外植体接种、选择处理和扩增）从同一RAA活检样本中分离成体CPC和CDC。

2

在第3代，检测CPC、CDC的表面标记。

两种细胞均表达间充质干细胞标志物和心肌细胞系特异性标志物；均不表达造血标志物、肥大细胞标志物或心肌细胞系特异性转录因子。不过CPC有85%c-kit+。

3

阿尔玛蓝法检测第3代细胞增殖情况。

CPC的增殖能力是同一患者来源的CDC的4倍多。

CPC比CDC在生长和迁移特性更优，且与心肌梗死后心肌功能恢复能力的提高有关。

4

β-半乳糖苷酶测定法评估第6代的衰老。

与CPC相比大多数成年CDC发生衰老，明显表现为β-半乳糖苷酶活性增加。

5

通过跨孔（Transwell）迁移实验测量了两种祖细胞类型的迁移潜能。

在血清存在下孵育6小时后，与CDC相比，有相当数量的CPC迁移

6

构建LAD啮齿动物心肌梗死模型。通过在心肌梗死后24小时进行超声心动图检查，验证了每一治疗组心肌梗死模型的一致性（超声心动图显示三组在此时间点的射血分数EF相似）。分别移植取自同一心脏活检的CPC、CDC和无细胞对照。1周后行超声心动图评估心功能。

培养基对照组相比，移植的CPC和CDC显著改善心脏的功能和结构，表现为EF、缩短分数SF增加，舒张末期容积EDV和收缩末期容积ESV下降。CPC更显著。

7

在心肌梗死后第28天通过组织学分析进一步评估左心室的结构变化，重点是纤维化(Masson染色)、小动脉密度(检测SMA)和总血管密度(IB4)。

心肌梗死后4周，心肌梗死面积这些指标在CDC或CPC组均改善，CPC组更明显。

间充质干细胞标志物：CD和CD90。心肌细胞系特异性标志物：NKX2.5和肌钙蛋白I。造血标志物：CD34和CD45。肥大细胞标志物：类胰蛋白酶。本文中还用了心肌细胞系特异性转录因子GATA4。凋亡小体标志物：细胞色素c。

阿尔玛蓝（alamarblue）具体可参考：

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