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蜂王浆促进细胞生长的最新研究
随着生物技术的发展,许多学者在细胞水平上对蜂王浆的生物活性进行了研究。蜂王浆含有丰富的蛋白质、脂肪酸、糖类、激素、矿物质和微量元素等,其中占干重30%~50%的王浆蛋白以及王浆标志物10-HDA在蜂王浆生理活性方面起重要作用。本文主要介绍了蜂王浆促进细胞生长作用的研究情况。
1蜂王浆中促细胞生长的成分
1.1蜂王浆全组分
蜂王浆对实验动物的药理活性作用已被多次报道,PolomaJamnik等人为研究蜂王浆全组分的抗氧化性、抗衰老性,以酵母细胞为模式生物进行了实验。他们以添加不同浓度的蜂王浆YEPD培养基培养酵母细胞,测定其生长情况、细胞能量代谢活性及细胞内氧化情况,发现蜂王浆对细胞内氧化作用呈剂量依赖性,对细胞生长和细胞能量代谢作用呈生长阶段依赖性,用双向电泳分析细胞提取物的蛋白质谱,发现蛋白质的表达也受到影响,随后,他们对差异蛋白进行了分析。
日本的研究人员研究了在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)刺激下蜂王浆对小鼠牙周韧带细胞克隆22(MPDL22)的作用,结果表明,蜂王浆能抑制MPLD22细胞中IL-6和CXC趋化因子配位10的产生以及CD54的表达。T.Karaca等人研究了蜂王浆对乙酸诱导的大鼠大肠炎的作用,发现大肠炎刺激的CD3+和CD45+T细胞的增殖反应被蜂王浆抑制,表明蜂王浆对乙酸诱导的大鼠大肠炎具有消炎作用,能抑制细胞再生。韩国学者通过研究蜂王浆在小鼠黑色素细胞系B16F1中的作用后发现,蜂王浆并不抑制B16F1黑色素瘤细胞的增殖,但以剂量依赖性显著抑制黑色素合成,且这一抑制作用是通过下调酪氨酸酶mRNA转录来完成的。
1.-HDA
10-HDA是由德国科学家DJ朗格于年首次在工蜂上颚腺中发现的物质。10-HDA又称王浆酸或蜂王酸,其含量占蜂王浆中脂肪酸的一半以上,是蜂王浆中含量最高的脂肪酸,在鲜王浆中占1.4%~1.9%。常温下表现为白色晶体,熔点为64℃,溶于甲醇、乙醇、乙醚和氯仿,微溶于丙酮,不溶于水。其性质稳定,在室温或高温下长时间贮存时,结构不会被破坏或完全消失。
戴静芝通过配制不同pH环境的艾氏腹水癌细胞并对小鼠进行腹腔注射,研究了10-HDA抗肿瘤的作用,发现10-HDA对肿瘤细胞的抑制作用明显,并且能够促进吞噬细胞的增长。田静等研究了不同剂量的10-HDA对原代培养的大鼠海马组织神经元的增值效果,发现中剂量(0.1μmol/L)的10-HDA作用海马神经元24h后细胞数量增多,且用BrdU免疫荧光染色和尼氏染色都印证了10-HDA对大鼠海马神经元增殖的作用。
高荣敬等研究了不同浓度的10-HDA对体外培养的大鼠小脑神经细胞的增殖和存活的影响,通过BrdU、尼氏染色、MTT法对培养后的细胞进行检测,发现不同浓度的10-HDA均能促进大鼠小脑神经细胞的生长和增殖,且呈一定的浓度依赖性。此外,10-HDA通过调节基质金属蛋白酶转录表达、降低JNK和p38MARK通路的活化,对U-VA作用下的人皮肤成纤维细胞有很好的保护作用。Dusan等人用10-HDA处理人类树突状细胞,通过测量10-HDA处理后MoCPs细胞上清液中IFN-γ、IL-4水平的水平,发现10-HDA对人树突状细胞的免疫调节作用呈剂量依赖性变化。
1.3王浆主蛋白
MakootoFujii等研究了蜂王浆中kDa蛋白对原代培养大鼠肝细胞的作用,发现在无血清培养基上添加kDa糖蛋白可保持原代培养的肝细胞贴壁生长20天,且肝细胞分泌的白蛋白数量在前2天保持较高水平接着会降低到相对低的水平。Kazuhiko等人发现王浆中的DIII蛋白可以在无血清的培养基上促进人类淋巴细胞系的生长,并且用铕标记的DIII蛋白的结合实验显示,在U-细胞表面有大量的低亲和性受体。Kazuhiko等还通过离子交换层析法对蜂王浆进行了分离,获得的DIII蛋白可促进人骨髓细胞系U的生长,并经SDSPAGE实验证明,该蛋白分子量为57kDa,且DIII蛋白的生长活性对热和pH表现稳定。之后,MasakiKamakura等人研究了57kDa对原代培养大鼠肝细胞的生理影响,发现57kDa蛋白能明显刺激肝细胞DNA的合成,而牛血清蛋白、贮存在4℃下7天的王浆(已失去57kDa)未有这种促合成情况,且在用胰岛素处理后,57kDa的这种特性消失,提示57kDa蛋白的作用类似于促细胞分裂素。此外,研究还发现57kDa蛋白的刺激作用呈剂量依赖性,并且与高细胞密度相比,57kDa蛋白在低细胞密度上的作用更有效。
L.A.Salazar-Olivo等人对意大利蜜蜂王浆的不同蛋白质组分进行了研究。他们从蜂王浆中提取出粗蛋白,发现对昆虫Tn-5B1-4细胞生长有很好的刺激作用,每增加1mg王浆粗蛋白可使细胞倍增6.5倍,而添加胎牛血清的情况只能引起2.55倍的倍增,用硫酸铵沉淀法从王浆粗蛋白中得到的RJP30和RJP60组分也影响着Tn-5B1-4细胞的形状及附着力。RJP30能够刺激鼠科动物的3T3-FA前脂肪细胞转化为成熟脂肪细胞,其效果比胰岛素好2倍,粗蛋白和RJP60也有类似效果。RJP30还能对海拉人类子宫癌细胞Hela产生生长抑制作用,用RJP30处理7天后,细胞数目减少2.5倍。以上结果表明了王浆蛋白对于细胞生长作用的多样性,它对昆虫、鼠科动物和人类癌细胞分别有促生长、促分化和抑制生存的作用。
1.4其他成分
TanjaDzopalic等人发现,蜂王浆中的3,10-DDA能够刺激人外周血单核细胞来源的树突状细胞(MoDCs)成熟,上调CD40、CD54、CD86和CD1a,提高白介素IL-12、IL-18的产量。与异源CD4+T细胞共同培养时,可以刺激γ-干扰素的产生、下调IL-10的产量。
2前景与展望
随着生物技术的发展,蜂王浆的作用在细胞水平上渐渐得到儿童白癜风该如何治疗有什么土方治白癜风