热点文章李鼎锋谈人骨肉瘤细胞MGM

目的通过研究体外培养的人骨肉瘤细胞株Saos-2，MG-63细胞O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（O6-methylguanine—DNAmethyltransferase;MGMT）基因启动子甲基化状态，分析去甲基化制剂5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine;5-Aza-CdR）对MGMT基因表达以及对烷化剂药物耐药性的影响，明确MGMT在骨肉瘤中的表达机制及意义。方法提取人骨肉瘤细胞株Saos-2和MG63细胞基因组DNA，采用甲基化特异性PCR（MSP）检测MGMT基因的甲基化状态，5-Aza-CdR处理体外培养的细胞，采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞用药前后对烷化剂药物的敏感性，并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达变化。结果正常培养的Saos-2细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态，MGMT蛋白表达微弱；用5-Aza-CdR处理后Saos-2细胞MGMT蛋白表达明显增强，对烷化剂药物的敏感性发生逆转，用药前后细胞生存率差异有统计学意义。正常培养的MG63细胞MGMT基因启动子呈未甲基化状态，5-Aza-CdR处理前后均能表达MGMT蛋白，表达量差异无统计学意义，烷化剂药物的敏感性在5-Aza-CdR用药前后变化其差异无统计学意义。结论骨肉瘤细胞的MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力，有可能参与肿瘤发病机制，并影响肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性。

骨肉瘤；O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶；启动子甲基化；5-氮-2’-脱氧胞苷Osteosar







































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