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学点免疫分型正常骨髓之B淋巴细胞分化
流式免疫分型的样本类型有骨髓、外周血、组织标本、脑脊液、胸腔积液、灌洗液等,最常用的就是骨髓样本,了解正常的骨髓表型是做好免疫分型的基础,近期我们会分期介绍正常骨髓的特点,本期介绍正常B淋巴细胞分化。
B细胞阶段抗原表达通过观察抗原的表达与否、表达强弱程度,可对细胞的发育阶段进行鉴别。
推荐抗体组合Staining1:TdT/CD20/CD19/CD10
★在CD19+的细胞中,分析CD10和CD20的表达,可将B淋巴细胞分成四个依次分化成熟的阶段(右图),随着细胞的发育成熟,CD10表达逐渐降低,CD20的表达逐渐升高。红色部分对应Pre-Pre-B,绿色部分对应Pre-B,黄色部分对应Immature-B,紫色部分对应Mature-B。再此基础上增加TdT,可使Pre-Pre-B与Pre-B有更好的区分(左图)。
★Staining2:CD45/CD34/CD19/CD22
★CD19+的细胞中,分析CD34、CD45、CD22的表达亦可将B淋巴细胞分成四个部分,最早期的细胞(红色部分)表达CD34、CD22、弱表达CD45,随着细胞的成熟,CD22和CD45的表达逐渐增强。另外,此种抗体组合方式还能识别出CD19-CD22+CD34+的Pro-B细胞。
★生理因素影响★
在低年龄段儿童中,CD10+的不成熟幼稚B细胞会占优势地位,成年人中CD10-CD20+的B细胞会占优势地位;老年人(一般>75岁),骨髓中成熟B细胞比例增高,CD10-CD20-的浆细胞(蓝色部分)会作为CD19+B细胞的一部分出现在骨髓中。
★治疗影响 ★
在经过治疗后的骨髓再生期,特别是ALL患者化疗后,大量的Pre-B细胞会被观察到。TdT+CD10+(红色部分)和TdT-CD10+(绿色部分)的Pre-B细胞的比例还可发生倒置现象。
★除外上述影响因素以外,抗原表达的异常应高度被警惕,比如样本中的大部分细胞均高表达CD10,却不表达TdT;又或者低表达CD45却高表达CD22等。
:CytometryPartB(ClinicalCytometry)60B:1-3()
编辑:张宝华
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