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细胞毒性amp细胞活力检测周四0
导读
小邦在上一章节里简要的介绍了细胞凋亡及其检测方法，今天小邦给大家简要的介绍细胞毒性细胞活力检测。
细胞毒性细胞活力简介
细胞毒性是由合成化合物、细胞自然产生毒性或免疫调节细胞（如细胞毒性T淋巴细胞，自然杀伤细胞等）引起的细胞杀伤事件。同细胞凋亡及坏死不同，细胞毒性不是指某种特定的细胞死亡机制。细胞活力检测是检测样本中健康细胞的数目，这在优化细胞培养条件实验（如未分化细胞培养，原代细胞培养等）中是必须的。主要研究方法包括膜损伤检测、代谢活性检测、DNA合成检测等。
膜损伤检测
使用染料对细胞进行染色（台盼蓝染色法），膜受损细胞将会染上色，清点未着色的健康细胞数目，从而检测细胞膜的状态。另一种目前更常用的方法是对细胞培养上清液中的LDH酶活性进行检测。CytotoxicityDetectionKitPLUS(LDH)是使用ELISA方法在96/孔板中高通量地定量检测细胞毒性。LDH是个稳定的细胞质蛋白，正常情况下在所有细胞中保持几乎相同的浓度，因此可通过检测受损细胞释放的LDH，对细胞毒性/细胞活性进行简单定量，从而判断细胞膜的受损情况。此外，还可通过检测上清液中的其他酶活方法来检测细胞毒性，如碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。
代谢活性检测
通过添加四咪唑盐到细胞中可进行线粒体内酶代谢活性的测定。在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。现有的方法如MTT法、XTT法、WST-1法及CCK-8法。各种方法比较如下：
DNA合成检测
DNA的新组装合成是细胞生长的必要条件，故经常被用来进行细胞增殖、细胞活力及凋亡的检测。BrdU及EdU，都是胸腺嘧啶的非放射性类似物，能掺入增殖细胞的DNA中，可通过对BrdU及EdU的检测，从而对DNA的合成量进行测定。
小贴士
前两期的细胞凋亡介绍及今日的细胞增殖、毒性活性检测，都同在细胞凋亡实验手册里。有需求的小伙伴，请留言。留下您的大名、单位、联系方式即可。
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